小鼠神经干细胞产品信息
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| PC062 |
小鼠神经干细胞 |
Mouse |
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培养条件
- 培养基：DMEM/F12+1%N2+2%B27
- 气相：空气，95%；二氧化碳，5%
- 温度：37摄氏度
细胞描述
细胞描述：本公司培养出品的神经干细胞（NPC）取自12天C57小鼠胚胎的端脑，用DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基进行原代培养和传代。
细胞生长：神经干细胞悬浮成“神经球”生长。
细胞规格：1ml 冻存管 （1x106）或者 1个25cm2的培养瓶。
细胞活力：＞90%
细胞代数：P2~P3
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞传代：
1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
产品说明书
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